近期细胞培养基,四川新生命干细胞科技股份有限公司研发团队发明了一种全新细胞培养基的用于扩增脐带血造血干细胞的滋养层制备方法,利用这种滋养层扩增的脐带血造血干细胞数量明显高于传统方法。据悉,该发明已向国家知识产权局提出专利申请并已获得受理。
脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液,通常是废弃不用的,近几十年的医学实践证明,脐带血中含有可以重建人体造血和免疫系统的造血干细胞,是造血干细胞的重要来源之一。脐带血造血干细胞在移植物抗宿主病、HLA 配型等方面具有天然优势,且其细胞扩增潜能也优于骨髓、外周血来源造血干细胞,应用途径更具有进一步挖掘、拓宽的优势。
既往研究发现,间充质干细胞虽然可以作为滋养层培养造血干细胞,但也会在培养中大量增殖,并在培养一段时间后脱落凋亡,产生溶酶体等物质,改变培养基pH值环境,极大影响造血干细胞的扩增。曾有文献报道称,用丝裂霉素处理间充质干细胞可以阻止其增殖,但残留的丝裂霉素又会对扩增的造血干细胞造成非常不利的影响。
经过反复试验,新生命干细胞公司研发团队发现,将间充质干细胞悬液接种到包被了胶原蛋白的细胞培养板中,培养至细胞融合度为70%-90%,制备而成的间充质干细胞滋养层在培养48小时后,相比传统方法铺板的间充质干细胞滋养层,细胞增殖速度大幅降低,体积明显增大细胞培养基;在加入CD34+脐带血造血干细胞共同培养12天后,CD34+脐带血造血干细胞的增殖不但数量明显,而且用胰酶将间充质干细胞消化后进行台盼蓝染色显示,新方法扩增的造血干细胞活率也明显优于传统方法。
实验结果表明,采用新方法制备的间充质干细胞滋养层具备增殖速度慢,细胞死亡少的优势,能够为脐带血造血干细胞的体外扩增提供有力的支持,显著地提高了扩增效率,为脐带血造血干细胞更多用途的应用提供了强有力的支撑,具有广阔的应用前景。